酶联免疫吸附测定,什么是酶联免疫吸附法?
1、什么是酶联免疫吸附法?
酶联免疫吸附法(enzyme:linked:immunosorbent:assay,ELISA)是把抗原—抗体的免疫反应与酶的催化反应相互结合而发展起来的一种综合性技术,它的灵敏度高,特异性强,特别是当寄主体内病毒浓度很低或同时存在病毒钝化物或抑制剂时,它的优势尤为明显,因而是近年来病毒检测方法中发展最快、应用最广的一种方法。
此方法的原理是利用以酶标记的特异抗体来指示抗原—抗体的结合,从而检出样品中的抗原。
具体操作程序是:将待检植物汁液(抗原)注入酶联板(聚苯乙烯多孔微量反应板)中,使抗原吸附于它的孔壁,然后加入以酶标记的特异抗体,待抗原与抗体充分反应后,洗去未与抗原结合的多余酶标记抗体,于是在固相载体酶联板表面就只留下以酶标记的抗原—抗体复合物。这时加入酶的无色底物,复合物上的酶催化底物降解,生成有色产物,其强度与病毒浓度呈正比。这一结果可用肉眼识别,也可用分光光度计对底物的降解量进行测定。
2、什么是酶联免疫吸附试验?
看到一篇关于组织生理学方面的论文,里面用到这样的方法。因为是外行,所以想问这个测试一般用于什么方面?
3、酶联免疫吸附测定的原理是什么?
原理是抗原与抗体之间的特异性结合。酶联免疫吸附是在固相载体上包被好能与目的抗原特异性结合的抗体,当检测样本中含有目的抗原时,其会与固相载体上的抗体相结合,并加入和链接化学发光酶,通过冲洗去掉其他非目的抗原,加入显色底物与之反应,此时吸光度越大也就是颜色越深的就说样本中明目的抗原越多,没有颜色反应的就是不含有目的抗原。
酶联免疫吸附测定,是指利用抗体分子能与抗原分子特异性结合的特点,将游离的杂蛋白和结合于固相载体的目的蛋白结合,并利用特殊的标记物对其定性或定量分析的一种检测方法。其原理是:抗原或抗体能物理性地吸附于固相表面,并且保持其免疫活性;抗原或抗体能与酶通过共价键形成酶结合物,同时保持各自的免疫活性或酶活性;酶结合物与相应的抗原或抗体结合后,能通过加入底物的颜色反应来确定免疫反应的发生,颜色反应的深浅与标本中相应抗原或抗体的量成正比。
4、医学上ELISA,是什么意思。
酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,简写ELISA)
指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法;酶联免疫吸附测定(ELISA)为免疫学中的经典实验。
基本原理为:使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。
结果判断——
1、定性测定:
定性测定的结果判断是对受检标本中是否含有待测抗原或抗体作出"有"或"无"的简单回答,分别用"阳性"、"阴性"表示。"阳性"表示该标本在该测定系统中有反应。"阴性"则为无反应。
2、定量测定:
ELISA操作步骤复杂,影响反应因素较多,特别是固相载体的包被难达到各个体之间的一致,因此在定量测定中,每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。
来源:百度百科-ELISA
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